TOM/TIM前导序列导入验证：如何建立Par3线粒体定位的因果关系？

功能依赖于TOM/TIM前导序列导入途径（例如，Δψm依赖性、TIM23/TOM20需求）未得到直接证明。虽然相互作用数据（图1L–O）和MTS定位（图1F–I）具有说服力，但它们并未确立TOM/TIM机器对Par3导入的必要性。通过直接干扰前导序列导入（例如，膜电位崩溃或急性耗竭TIM23/TOM20）并展示线粒体Par3的减少，可以因果地将该途径与导入联系起来。存在标准方法来测试膜电位依赖性[1]和组分需求[2]，这使得验证实验成为可能。没有这些测试，尽管有强烈的定位和相互作用证据（图1A–E, 1F–O），机制上的“通过TOM/TIM”部分仍属推断。