免疫组织化学切片制备流程详解

为了制备免疫组织化学切片，将相关组织块切成4到5微米厚的切片，放置在载玻片上，然后在37°C下放置16小时，再在60°C下放置1小时。为了分三步脱蜡，依次将其置于二甲苯、无水乙醇和96%、80%、70%的乙醇溶液中（每种溶液中各放置2次，每次5分钟），并用流动水冲洗。随后将组织置于缓冲液（pH = 8.7）中，并转移到微波炉中，以最大功率加热至缓冲液沸腾。然后将微波炉功率降低40%，15分钟后取出组织，置于室温下15分钟。用流动水和TBS缓冲液（pH = 9）冲洗以中和内源性过氧化物后，将过氧化物酶抑制剂溶液倒在载玻片上10分钟，再用流动水和TBS缓冲液冲洗（每次2次，每次5分钟）。去除载玻片表面多余的缓冲液，使用DAKO笔确定组织纹理。