中和抗体阻断IFNγ R1、TNFR1、ICAM-1或FAS保护旁观者细胞

使用中和抗体阻断IFNγ R1、TNFR1、ICAM-1或FAS部分保护旁观者细胞免受BiTE®介导的细胞毒性 在EGFR阴性的SW620细胞与重组IFNγ和TNFα预孵育后，其对BiTE1介导的旁观者杀伤的敏感性增加，这与ICAM-1和FAS的上调一致。为了测试IFNγ受体（IFNγ R1）、TNFα受体（TNFRSF1A）、ICAM-1或FAS的配体结合是否参与了旁观者杀伤，使用中和抗体在SW620细胞与BiTE1激活的T细胞共培养前阻断这些分子。与对照抗体相比，阻断IFNγ R1和TNFR1显著减少了BiTE1激活的T细胞介导的旁观者杀伤（图7A）。阻断SW620细胞上的ICAM-1（图7B）或FAS（图7C）也显著且可重复地保护了BiTE1介导的细胞毒性，其中中和ICAM-1的效果强于中和FAS。作为FAS介导细胞毒性的对照，用细胞因子预处理以增加FAS表达的SW620细胞随后与FAS激动剂抗体共孵育，结果表明，FAS中和抗体完全消除了这种细胞毒性（补充图S6，左面板）。FAS激动剂抗体对未用细胞因子预处理的SW620细胞没有影响（补充图S6，右面板）。