CD3xROR1 T细胞接合剂制备与实验流程详解

CD3xROR1 T细胞接合剂（TCEs）被制备并以5倍或10倍系列稀释的方式稀释于含10%胎牛血清和1%青霉素/链霉素的RPMI1640培养基中，浓度范围从200 nM到2.56 pM。然后将不同浓度的50 μL制备好的CD3xROR1 TCEs加入到96孔板中指定的含有T细胞和靶细胞的孔中，并在CELLINK CELLCYTE X中于37°C、5% CO2条件下孵育。每孔中的ROR1+ MD-MB-231 RFP细胞和ROR1- T-47D eGFP FLUC细胞的数量每3小时监测一次，持续72小时。每个孔中靶细胞数量的变化随时间绘制，并通过将零时刻的靶细胞数量作为100%基准来计算靶细胞的杀伤百分比。