粒酶与死亡受体介导的凋亡机制对比

粒酶/穿孔素介导的凋亡与死亡受体介导的凋亡之间的一个关键区别在于后者信号传导途径的特征明确，因此有可能靶向下游通路（41）。因此，我们筛选了已知在Fas通路中具有调节活性的蛋白家族，并鉴定了能够增强Fas介导细胞死亡的小分子抑制剂（补充图S4A和S4B）。我们假设这些药物可能使癌细胞对靶向和旁观者T细胞杀伤更加敏感。使用Ag+或Ag−以及WT或Fas−/−淋巴瘤细胞的共培养系统，组蛋白去乙酰化酶抑制剂（HDACi）帕诺比诺司他治疗显著增加了肿瘤中的Fas水平（补充图S4C）。同时，当与抗原特异性T细胞共培养时，Ag+和Ag−群体中的caspase-3裂解均增加，而同一培养中的Fas−/−群体未见反应（图3C和D）。在使用凋亡蛋白抑制剂拮抗剂（IAPi）比林纳潘特和BCL2/xL抑制剂ABT-737治疗后，也观察到Fas依赖的靶向和旁观者凋亡的增强（图3D；补充图S4D）。为了确保各种指标支持相同的结论，我们使用不同的活力测定法确认了类似的结果（补充图S4E）。例如，1 nmol/L帕诺比诺司他对基线时A20-GFP（第1和4列）和A20-mCherry（第9和12列）的活力几乎没有影响（<1%），但增强了JEDI诱导的靶向杀伤31%（第5和8列）和旁观者杀伤32%（第13和16列）。IAP和BCL2/xL抑制剂的联合使用也表现出大于加性的效果（补充图S4E）。重要的是，所有化合物对同一共培养中的T细胞活力几乎没有影响（补充图S4F），这表明这些联合疗法不会通过Fas介导的机制增强T细胞自相残杀（42）。