小鼠肿瘤异种移植中的旁观者杀伤效应研究

在小鼠肿瘤异种移植中观察到旁观者EGFR阴性肿瘤细胞的裂解。 为了研究体内旁观者杀伤效应，将荧光素酶标记的EGFR阴性SW620细胞（SW620-LUC）和EGFR阳性HCT116细胞（未标记荧光素酶），单独或按1:1比例与人T细胞（E:T 1:1，其中混合培养物中的靶细胞数量为EGFR阳性和阴性细胞的总和）结合，并植入免疫缺陷小鼠中。选择HCT116细胞是因为其在体内的生长速率与SW620细胞大致相当，并且它们的EGFR表达水平与NUGC4相似（表1）。体外裂解HCT116细胞和NUGC4细胞的EGFR BiTE1 EC50值分别为0.7 pM和0.4 pM，具有可比性（图S3）。小鼠在肿瘤植入后的第二天开始每天接受EGFR BiTE1或MEC14阴性对照BiTE1治疗。尽管个别对照组小鼠的异种移植生长存在固有的变异性，但在研究中期（第8天和第11天）通过发光测量显示，与阴性对照BiTE1治疗相比，EGFR BiTE1治疗显著减少了1:1混合植入物中EGFR阴性SW620-LUC细胞的发光（图4A）。研究结束时（第21天）的肿瘤体积显示，与MEC14对照BiTE1相比，EGFR BiTE1对含有EGFR阳性细胞或混合EGFR阳性和阴性肿瘤细胞的植入物表现出高度显著的生长抑制作用，但对仅含EGFR阴性肿瘤细胞的植入物没有这种作用（图4B）。在某些接受混合植入的小鼠中，研究结束时检测到小的、组织学上EGFR阴性且荧光素酶阳性的肿瘤。无论使用EGFR BiTE1还是MEC14对照BiTE1治疗，EGFR阳性组和1:1混合组之间的肿瘤体积没有显著差异。因此，在体外观察到的旁观者杀伤效应在异种移植模型中得到了重现。