液体活检如何实现胃癌早期诊断？2025最新ctDNA监测技术解析

具有最小侵入性，使患者广泛接受，没有主要副作用[4]。液体活检（主要使用外周血）可以作为筛查方法来检测早期胃癌（EGC）和术后微小残留病灶（MRD），并为胃癌患者制定合适的治疗计划。 循环肿瘤细胞/循环肿瘤DNA 循环肿瘤细胞（CTCs）定义为从原发肿瘤或转移灶脱落并进入患者血液中的肿瘤细胞，其特征是易于获取的癌症标本。作为一种液体活检，新兴的CTC分离技术已经促进了CTC病理学的研究，并推动了CTC在恶性肿瘤诊断中的临床应用[5]。尽管许多研究者得出了相同的结论，即CTCs阳性与预后相关，但在早期诊断方面，尤其是在过去几年中，相关研究较少。 循环无细胞DNA（cfDNA）由可在血液中找到的细胞外DNA片段组成[6]。不同病理状态下的cfDNA变化已被成功用于液体活检的无创生物标志物。特别是，从肿瘤中鉴定出并显示肿瘤特异性突变的cfDNA被称为循环肿瘤DNA（ctDNA）[7]。ctDNA的分析在过去十年中引起了极大的兴趣，因其在体液中的显著稳定性。此外，越来越多的证据表明，ctDNA在手术后疾病进展过程中的早期发生是有用的。ctDNA检测系统的进一步改进正在进行中。基于cfDNA的液体活检在早期诊断中的主要限制是早期癌症释放的低信号，这直接影响测序分析的敏感性。 最近的一项研究描述了循环生物标志物，如cfDNA，在I期胃癌患者中的表达明显高于良性胃病患者和健康对照组，表明这些生物标志物在早期检测胃癌方面的潜力[8,9]。在ctDNA中检测到的人表皮生长因子受体2（HER2）基因拷贝数在胃癌患者中高于健康对照组。HER2拷贝数变异的阐明能够以58%的敏感性和98%的特异性区分健康个体和胃癌患者[曲线下面积（AUC）= 0.707，95%置信区间（CI）：0.593-0.821][10]。ctDNA测序在晚期胃癌患者中识别出组织检测未发现的成纤维细胞生长因子受体2（FGFR2）扩增，这些患者可能对FGFR抑制有反应。ctDNA可以检测血浆中的FGFR2改变，有时比组织检测的频率更高，识别出这些患者，这些患者可能对FGFR抑制有反应[11]。 当前的癌症生物标志物可以分为两类：（1）通常用于特定类型癌症检测的生物标志物；（2）旨在决定个性化医疗的生物标志物，例如伴随诊断。即使手术成功进行，术后检测MRD仍对医生构成挑战，使用影像学检查或组织活检难以及时检测MRD。最近的研究表明，基于ctDNA的检测可以在影像学检查前几周检测到MRD[12]。另一项监测术后血液中ctDNA的研究证实，从ctDNA阳性检测到复发的中位时间为4.05个月[13]。此外，术后ctDNA阳性与术后12个月内肿瘤复发显著相关，表明术后ctDNA监测在预测术后胃癌复发方面具有临床应用价值[13]。类似地，ctDNA阳性比影像学复发提前中位6个月出现，表明ctDNA是寻找在接受根治性治疗后高复发风险患者的敏感和特异性生物标志物[14]。ctDNA阳性的患者复发风险更高，结果更差，与ctDNA阴性组相比，这表明在治疗后的监测中，ctDNA监测有望提供进一步治疗必要性的知识[15]。通过超深度测序方法评估了ctDNA作为纵向疾病监测和识别胃癌MRD的生物标志物的临床实用性。在术后、辅助化疗后以及随后的纵向时间点可测量ctDNA的患者中，复发的发生率分别为100%（7/7）、100%（5/5）和94%（16/17）。目前，新的高通量测序技术，如下一代测序（NGS）或全外显子组测序，可以识别多个基因区域的突变[16]。最近的一项研究通过全基因组测序对1630名胃癌和食管腺癌患者进行了术后复发疾病的监测。利用Guardant 360 ctDNA-NGS检测法，成功手术后检测到的MRD与复发风险增加密切相关[17]。这些研究表明，通过结合ctDNA可以预测患者对辅助化疗的升级或降级的风险分层。在胃癌术后监测中，ctDNA指导的治疗策略是一种新的新兴策略，可能会取代当前的治疗决策，如图1所示。 非编码RNA 多种非编码RNA（ncRNA），如microRNA（miRNA）、环状RNA（circRNA）和长链非编码RNA（lncRNA），参与胃癌的发生[18]。miRNAs是大约18-22个核苷酸的小ncRNA分子，调节细胞分化、增殖、凋亡和基因调控[19]。目前，由于在循环中表达的稳定性和特异性，越来越多的证据表明，miRNAs可以作为胃癌患者的新生物标志物，具有潜在的临床意义工具。miRNAs在血液中非常稳定，可以通过各种测定方法（如逆转录）进行鉴定。