T细胞活化检测技术详解

T细胞活化检测 从96孔TDCC检测中分离出T细胞，离心、洗涤后，使用CD45-APC、CD69-FITC和CD25-PE（BD Biosciences）在4°C下染色30分钟，随后进行两次洗涤。事件在FACS CANTO上获取，并使用FCS Express进行分析。为了确保检测中有足够的事件，将96孔板中的四个重复孔合并。 可溶性因子 未稀释或稀释后的细胞上清液按照制造商的说明进行检测（IFNγ、TNFα、IL-1β和IL-6使用Meso Scale Discovery，FAS配体使用RayBiotech ELISA，Granzyme B（CTLA-1）使用Abcam）。在某些情况下，将重复孔中的培养基合并以确保有足够的材料用于检测。