LGR5与c-MYC抗体实验步骤详解

切片在柠檬酸缓冲液中冷却20分钟。然后，切片在甲醇中与3%（w/v）H2O2孵育，以抑制内源性过氧化物酶活性，随后在室温下与通用蛋白封闭剂（Abcam ab64226，日本东京）孵育30分钟以封闭LGR5的非特异性抗体结合位点，或与正常马血清（Vectastain Elite ABC试剂盒；Vector Laboratories，美国加利福尼亚州伯灵格姆）孵育30分钟以封闭c-MYC的非特异性抗体结合位点。切片依次与兔多克隆抗LGR5抗体（1:400稀释）或小鼠单克隆抗c-MYC抗体（1:500稀释）在4°C下孵育过夜。