SPR技术在测量抗体亲和力时有哪些局限性？如何通过实验设计弥补这些不足？

SPR的局限包括：1）固定化抗原可能改变天然构象（如膜蛋白三维结构失真）；2）缓冲条件非生理性（pH/离子强度差异）；3）无法模拟细胞膜环境。改进方法：1）使用纳米盘模拟膜环境；2）结合细胞实验（如流式验证）；3）多参数优化（如温度梯度测试）。例如，某研究显示SPR测定的KD与细胞实验差异可达10倍，需交叉验证。