人源化免疫缺陷小鼠中的人类异种移植肿瘤模型研究

人源化免疫缺陷小鼠中的人类异种移植肿瘤模型 使用人类ROR1+异种移植三阴性乳腺癌（TNBC）小鼠肿瘤模型MDA-MB-231评估了ROR1 x CD3双特异性抗体（bsAbs）介导的体内肿瘤生长抑制（TGI）的能力。简而言之，NSG（NOD-scid IL2Rgammanull；杰克逊实验室）小鼠在右背部皮下注射5百万个混有Matrigel基质（康宁）的MDA-MB-231细胞。同一天，小鼠还通过静脉注射5百万个扩增的人类T细胞。用于注射的扩增T细胞是从多个健康供者中选择的，这些供者的T细胞对MDA-MB-231具有最低的同种异体反应性。具体来说，从两名健康供者的T细胞使用ImmunoCult™人CD3/CD28 T细胞活化试剂（干细胞科技公司）按制造商推荐的方案进行扩增。同种异体反应性通过我们在体外的生物发光细胞毒性测定和IFNg释放测定（如上所述）进行检测，定义为在E:T比为5:1时最大杀伤率不超过15%且最大IFNg释放量不超过300 pg/ml。当肿瘤体积达到75-100立方毫米时，小鼠被随机分为5组。第1组由5只小鼠组成，每周两次接受假处理（PBS）。第2-4组每组10只小鼠，分别每周两次接受hum-VHH-2-LC的剂量为0.03 mg/kg、0.3 mg/kg或3 mg/kg。第5组由7只小鼠组成，每周两次接受R11-scFv-1的剂量为3 mg/kg。每3-5天测量一次肿瘤体积，并记录小鼠的存活情况。实验结束时处死小鼠。